pcr實驗室是一個非常不尋常但非常重要的實驗室類型。主要作用是通過高納米的分子生物技術對病毒進行檢測,并對藥物的抗毒性和療效進行實驗。那么PCR實驗室是什么樣子的呢?
一.PCR實驗室區域設計
PCR實驗室區域設計
(1)合理設置各實驗區域;
(2)每個實驗區域應有明顯的標記(如醒目的門板或不同的地面顏色等),避免不同實驗區域的設備物品、試劑等混淆。
2、系統設置合理
(1)空調通風系統設置合理,盡量采用全送全排空調系統;
(2)嚴格控制氣流壓力,確保不同實驗區域的不同壓力要求。
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二.PCR實驗室人流物流設計
1、物流:在試劑準備區與標本制備區、標本制備區與PCR擴增區之間,以及擴增區域和純化區之間設計有電子連鎖不銹鋼傳遞窗,以單向進行試劑、標本等物品傳送,配制的試劑通過單向傳遞窗由試劑準備區傳遞到標本制備區,處理過的標本通過單向傳遞窗由標本制備區傳遞到PCR擴增區,按照工藝流程逐次傳遞,避免返流。單向物品傳送系統既保障了標本試劑不受污染,又保障了標本試劑不污染環境。
2、人流:人員通過閘間分別進入各自實驗區域,進出各實驗區域需要在閘間區域更換潔凈工作服,手消毒等。
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三.PCR實驗室分區及區域功能
PCR實驗室設計分為四個區域,進?各?作區域必須嚴格按照單??向進?,不同的?作區域使?不同的?作服(例如不同的顏
?)。?作?員離開各?作區域時,不得將?作服帶出,四區域分別為:
1.試劑配制區
2.樣品處理區
3.核酸擴增區
4.產物分析區如使?全?動分析儀,
區域可適當合并,三四區可合并為擴增產物分析。
各區的功能:完備的實驗室配套設施是保證實驗?作的必要條件,應根據各個實驗室實驗內容的不同配備相應的設備和儀器,如超凈?作臺、離?機、加樣器等。
PCR實驗室并沒有嚴格的凈化要求,但是為避免各個實驗區域間交叉污染的可能性,宜采?全送全排的?流組織形式。同時,要嚴格控制送、排風的?例以保證各實驗區的壓?要求。
1、試劑貯存和準備區 該實驗區主要進?的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應混合液的制備。試劑和?于標本制作的材料應直接運送?該區,不得經過其他區域。試劑原材料必須貯存在本區內,并在本區內制備成所需的貯存試劑。 對與?流壓?的控制,本區并沒有嚴格的要求。
2、標本制備區 該區域主要進?的操作為臨床標本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加??擴增反應管和測定RNA時 DNA的合成。本區的壓?梯度要求為:相對于鄰近區域為正壓,以避免從鄰近區進?本區的?溶膠污染。另外,由于在加樣操作中可能會發??溶膠所致的污染,所以應避免在本區內不必要的?動。
擴增反應混合物配制和擴增區 該區域主要進?的操作為DNA或DNA擴增。ft外,已制備的DNA模板和合成的DNA(來?樣本制備區)的加?和主反應混合液(來?試劑貯存和制備區)制備成反應混合液等也可在本區內進?。在巢式PCR測定中,通 常在第?輪擴增后必須打開反應管,因ft巢式擴增有較?的污染危險性,第?次加樣必須在本區內進?。 本區的壓?梯度要 求為:相對于鄰近區域為負壓,以避免?溶膠從本區漏出。為避免?溶膠所致的污染,應盡量減少在本區內的不必要的?動。個別操作如加樣等應在超凈臺內進?。
4、擴增產物分析區該區域主要進?的操作為擴增?段的測定。如使?全?動封閉分析儀器檢測,ft區域可不設。本區是最主要的擴增產物污染來源,因ft對本區的壓?梯度的要求為:相對于鄰近區域為負壓,以避免擴增產物從本區擴散?其它區域。
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