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PCR基因檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)要求
PCR基因檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室
基因檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)要求:
基因檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室平面布局:因?yàn)榇嬖诮徊嫖廴镜目赡埽诟鱾€(gè)功能區(qū)劃分布局上,必須遵照從試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)的單一順序,且各個(gè)功能區(qū)之間的試劑及樣品傳遞應(yīng)通過(guò)傳遞窗進(jìn)行。
實(shí)驗(yàn)室空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計(jì)及壓力控制:基因檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室雖然沒(méi)有嚴(yán)格的凈化等級(jí)要求,但為避免各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域間交叉污染的可能性,一般采用全送全排的氣流組織形式。同時(shí),也要嚴(yán)格控制送、排風(fēng)的比例以保證各實(shí)驗(yàn)區(qū)的壓力要求。
實(shí)驗(yàn)室裝修工程要求:實(shí)驗(yàn)室的墻體,包括頂棚,應(yīng)結(jié)構(gòu)牢固、氣密性好;所有陰角宜采用圓弧形線條過(guò)渡;墻體內(nèi)壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒;地面材料應(yīng)滿足無(wú)縫隙、無(wú)滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。
實(shí)驗(yàn)室污染的預(yù)防與控制:實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的核心問(wèn)題是如何避免污染。主要措施包括嚴(yán)格劃分工作區(qū)域、合理設(shè)置空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)、對(duì)實(shí)驗(yàn)室人員進(jìn)行嚴(yán)格規(guī)范操作培訓(xùn)、嚴(yán)密的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)出管理和更完善的配套設(shè)置等。
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如何解決PCR實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)被污染的問(wèn)題?
PCR反應(yīng)的特點(diǎn)是具有較大擴(kuò)增能力與極高的靈敏性,但令人頭痛的問(wèn)題是易污染,極其微量的污染即可造成假陽(yáng)性的產(chǎn)生。面對(duì)眾多的污染源,比如樣本交叉污染、試劑儀器交叉污染、克隆質(zhì)粒污染、PCR擴(kuò)增產(chǎn)物污染、還有極容易忽視的氣溶膠污染,氣溶膠是由固體或液體小質(zhì)點(diǎn)分散并懸浮在氣體介質(zhì)中形成的膠體分散體系,在空氣與液體面摩擦?xí)r,比如在操作時(shí)比較劇烈地?fù)u動(dòng)反應(yīng)管,開(kāi)蓋時(shí)、吸樣時(shí)及污染進(jìn)樣槍的反復(fù)吸樣都可形成氣溶膠而污染。這樣的污染來(lái)的悄無(wú)聲息,防不勝防。
雖然這些污染對(duì)PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響已經(jīng)受到了廣泛重視,多數(shù)PCR實(shí)驗(yàn)室對(duì)污染控制都采取了各種辦法,比如定期大掃除清理、劃分操作區(qū)域、試劑分裝、操作謹(jǐn)慎、重復(fù)實(shí)驗(yàn)、多角度驗(yàn)證結(jié)果。但是微量的核酸片段就能被擴(kuò)增,所以對(duì)污染物的控制不僅僅是做到這些就能夠杜絕和避免的,關(guān)鍵是需要從源頭控制。目前多數(shù)生物試驗(yàn)室,分子實(shí)驗(yàn)每天都在大規(guī)模進(jìn)行,污染源已經(jīng)無(wú)處不在,特異性的,非特異性的,同源的,非同源的,廣泛分布在樣本容器、實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面,試劑溶液中、儀器表面內(nèi)管附著等等。以下就是為了清除這些污染源研究出來(lái)的方法:
解決PCR實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)被污染的方法
1、酒精擦拭:將核酸沉淀,擦拭后保證污染表面污染得到一定程度的緩解(簡(jiǎn)單、方便、成本低)。
2、修飾:標(biāo)記遺傳物質(zhì),阻止聚合酶與核酸的結(jié)合,從而抑制DNA擴(kuò)散(效果相對(duì)較好)。
3、酶解:酶可將長(zhǎng)鏈的核酸分子降解成小片段(速度快、效果效果相對(duì)相對(duì)較好)。
4、高壓變性:高壓可以將核酸降解成20-30bp的小片段(徹底、成本低)。
5、紫外照射:PCR產(chǎn)物中嘧啶堿基會(huì)形成二聚體,延伸終止(方便、范圍廣、成本低)。
有實(shí)驗(yàn)室的地方,就不可避免的會(huì)出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室污染。實(shí)驗(yàn)室的污染,不僅會(huì)影響實(shí)驗(yàn)與科研的質(zhì)量和效果,還對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員的身體健康有損害。一個(gè)好的PCR實(shí)驗(yàn)室,應(yīng)當(dāng)時(shí)刻注意污染的監(jiān)測(cè),考慮有無(wú)污染是什么原因造成的污染,以便采取措施,防止和消除污染。集團(tuán)在醫(yī)學(xué)、醫(yī)院、臨床、分子生物檢測(cè)領(lǐng)域提供實(shí)驗(yàn)室、化驗(yàn)室、檢驗(yàn)科、科室的整體設(shè)計(jì)、裝修、建設(shè)、改造工程,可提供實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)方案、pcr實(shí)驗(yàn)室裝修方案、PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)方案,PCR實(shí)驗(yàn)室改造方案,集實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)、實(shí)驗(yàn)室潔凈(凈化)、實(shí)驗(yàn)室給排水、實(shí)驗(yàn)室配電、實(shí)驗(yàn)室供氣、實(shí)驗(yàn)室三廢處理(環(huán)保)等一站式服務(wù)。
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