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醫院PCR實驗室的布局與設計要點
現在的醫院普遍開展了PCR實驗室項目,而要完成一組pcr實驗通常需要在試劑配制區、樣品處理區、核酸擴增區、產物分析區這4大區域中進行。一個標準的PCR實驗室設計涉及到哪些方面呢?
醫院PCR實驗室平面布局:
試劑準備區:擴增試劑的配制、分裝和保存。
樣品處理區:樣品登記、分裝;核酸提取、保存和加樣。
核酸擴增區:該區域主要進行擴增實驗。
產物分析區:擴增產物的測定、結果分析、登記及報告。
各區配套的緩沖間及公共走廊。
注意:
1、擴增前區與擴增后區應嚴格分開,須使用不同的房間,兩區之間最好有一定的間隔。
2、使用商品化試劑盒可在樣品處理區進行少量試劑配制。
醫院PCR實驗室設計要點:
1、主體主要為彩鋼板材質,室內所有的陰角、陽角均采用鋁合金50內圓角鋁,結構堅固、密封性好。
2、將PCR分為試劑準備、標本制備和PCR擴增檢測三個獨立的實驗區,每個區域都有獨立的緩沖間,整個區域就是一個整體的緩沖走廊,通過各區域對氣壓的調節,整個PCR實驗室避免受到氣溶膠的污染。
3、緩沖間和PCR擴增區的排風扇往外排氣,外墻和各扇門上都安裝有風量可調的回風口,空氣通過回風口向室內換氣。
4、實驗區和緩沖間頂部以及傳送窗內配置紫外燈消毒,對于試劑準備區和標本制備區,可配置移動紫外線燈進行局面的消毒。
5、地面建議使用PVC卷材地面或自流坪地面,整體性好,耐腐蝕。
6、PCR實驗室可以是分散形式,也可以是組合形式。完成一組PCR實驗,通常應經過試劑配制、樣品處理、核酸擴增及產物分析四個實驗過程,若實驗工藝需要,還應增加樣品粉碎過程。
7、核酸擴增室及產物分析室應呈微負壓,以防含核酸的氣溶膠擴散出去污染試劑與樣品,可以通過控制排風風量大于進風風量達到負壓效果。
8、在理想情況下,PCR實驗室緩沖間內,可設置正壓,使室內空氣不流向室外,室外空氣不流向室內。 PCR實驗室進風由原有中央空調控制,要求將中央空調風口安裝到指定定點,且高度為地面鋪裝好后2600mm處。
9、若房間進深允許,可設PCR內部專用走廊。需要指出的是在減少室內外空氣交換方面,緩沖間比專用走廊較有意義。
10、每個區域之間應具備單向的實驗工藝流、物流、人與氣流,形成單向流程的保護屏障,這樣避免實驗的相互干擾,避免核酸氣溶膠對實驗過程造成污染產生假性結果。
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PCR實驗室在設計中應該注重什么呢?
實驗室可分為兩大功能工作區:核酸擴增前區和核酸擴增后區。
核酸擴增前區域包括試劑制備室和樣品制備室。兩個房間各自獨立,沒有任何空氣互通。兩個房間相對于外部空氣壓力處于正壓狀態。核酸擴增后區域包括擴增區 域和產物分析區域,其可以使用實時熒光PCR儀器、 HIV病毒載量測定器的PCR實驗室組合成一個房間。如果該區域分為兩個房間,則兩個房間也必須各自獨立,不 能有空中互通。后擴增區對外部空氣壓力處負壓狀態。
實驗室根據儀器的功能設置各種工作區域。例如,使用聚合酶聯反應:設置試劑儲存和準備區域、標本制備區域、擴增區域、擴增產物分析區域四個獨立的工作 區域,這是最常用的分區方法。如果需要粉碎樣品,則需要添加樣品破碎區;如果使用實時熒光PCR法:基因擴增區域、基因產物分析區域可以組合在一個房間;采用 標本處理、核酸提取和擴增檢測為一體的自動PCR分析儀,則樣品制備區域、擴增區域、擴增產物分析區域可以組合成一個區域,因此PCR實驗室原則上設置五個區 域或四個區域或三個區域或兩個獨立的工作區域。
實驗室設備是保障工作質量不可或缺的配置。在PCR實驗室設計中,應根據每個實驗室的要求提供不同的儀器和設備,如:離心機、生物安全柜、超潔凈工作臺、電泳(插槽)、電轉儀、雜交箱、水浴箱、 DNA測序儀、酶標儀和洗板機等等。
實驗室作為一種分子生物學技術,可以放大DNA片段,利用DNA基因跟蹤系統更快,更準確地檢測人體內的病毒含量。它為醫學治療提供可靠依據,為人們帶來了先進的、快速的、高效的醫療依據。
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