微生物實驗室培養(yǎng)

微生物實驗室一般實驗室工程和凈化工程不同。一般由主體實驗室和輔助功能實驗室組成，設(shè)計方案也與其他實驗室大不相同。

微生物安全實驗室必須保證人身安全、環(huán)境安全、廢棄物安全和樣品安全，可以長期安全運(yùn)行，同時為實驗室工作人員提供舒適、良好的工作環(huán)境。

微生物實驗室概況

食品微生物實驗室主要負(fù)責(zé)各種微生物項目的檢查，主要檢查項目有菌落總數(shù)、大腸菌群、霉菌、酵母、乳酸菌、雙歧桿菌、罐頭商業(yè)無菌、致病菌(沙門氏菌、志賀氏菌、溶血性鏈球、金黃色葡萄球菌等)。

微生物實驗室由準(zhǔn)備室、洗滌室、滅菌室、無菌室、恒溫培養(yǎng)室和普通實驗室六部分組成。這些房間的共同特點是地板和墻壁質(zhì)地光滑硬，儀器和設(shè)備陳設(shè)簡潔，易于清潔。

三級生物安全防護(hù)實驗室可以與其他用途的房屋設(shè)置在建筑物中，但必須設(shè)置區(qū)域。該區(qū)通過隔離門與公共走廊或公共部分相隔。

1.三級生物安全防護(hù)實驗室的核心區(qū)域包括實驗間和相連的緩沖間，緩沖間形成進(jìn)入實驗間的通道。必須設(shè)置兩個連鎖門，其中一個門打開時，另一個門自動關(guān)閉。使用電動連鎖裝置時，斷電時必須打開兩扇門。在緩沖間可以進(jìn)行二次更衣的實驗室通風(fēng)系統(tǒng)不設(shè)置自動控制裝置時，緩沖間面積不得過大，不得超過實驗間面積的八分之一的ii級或iii級生物安全柜的設(shè)置遠(yuǎn)離實驗間入口，避免員工頻繁移動的區(qū)域，有助于形成氣流從清潔區(qū)域流向污染區(qū)域的氣流型。

備用室用于調(diào)配培養(yǎng)基和樣品處理等。室內(nèi)設(shè)有試劑柜、儲存器具或材料的柜臺、實驗臺、電爐、冰箱和上下水道、電源等。

洗滌室用于洗滌器具等。因為使用過的容器被微生物污染，所以有時也有病原微生物。因此，在條件允許的情況下，最好安裝洗衣間。室內(nèi)需要加熱器、蒸鍋、洗盤用的盆、桶等，還需要各種瓶刷、去污粉、肥皂、洗衣粉等。

滅菌室主要用于培育基礎(chǔ)的滅菌和各種器具的滅菌，室內(nèi)需要高壓蒸汽滅菌器、烤箱等滅菌設(shè)備和設(shè)施。

無菌室又稱接種室，是系統(tǒng)接種、純化菌種等無菌操作的專用實驗室。微生物工作中，菌種接種移植是主要操作，該操作的特點是保證菌種純種，防止雜菌污染。在一般環(huán)境的空氣中，由于灰塵和雜菌很多，容易造成污染，對接種子的工作受到很大的干擾。

1.無菌室安裝

無菌室應(yīng)按經(jīng)濟(jì)科學(xué)原則安裝。其基本要求如下:

(1)無菌室應(yīng)有內(nèi)外兩個，內(nèi)外無菌室，外外外緩沖室。房間容積不要太大，以便空氣滅菌。最小內(nèi)間面積2×2.5=5m2，外間面積1×2=2m2，高度最好在2.5m以下，需要天花板。

(2)內(nèi)部應(yīng)設(shè)置拉門，以減少空氣波動，門應(yīng)設(shè)置在離工作臺最遠(yuǎn)的位置。外部門最好也使用拉門，設(shè)置在距離內(nèi)部最遠(yuǎn)的位置。

(3)在分隔內(nèi)外的墻壁和隔扇上，打開小窗戶，制作接種過程中必要的內(nèi)外傳遞物品的通道，減少人進(jìn)出內(nèi)外的次數(shù)，降低污染程度。小窗寬60cm，高40cm，厚30cm，內(nèi)外掛對拉的窗扇。

(4)無菌室容積小而嚴(yán)密，使用一段時間后，室內(nèi)溫度高，應(yīng)設(shè)置通風(fēng)窗。通氣窗應(yīng)設(shè)置在室內(nèi)入口的天花板上(即離工作臺最遠(yuǎn)的位置)，最好是雙層結(jié)構(gòu)，外層為百葉窗，內(nèi)層可以使用板式窗。通風(fēng)窗在室內(nèi)使用后，在滅菌前打開，可以流通空氣。有條件可以安裝恒溫恒濕機(jī)。

2.無菌室內(nèi)設(shè)備和工具

(1)無菌室內(nèi)桌面，無論是什么材質(zhì)、用途，都要求表面光滑和桌面水平。

(2)在內(nèi)室和外室各設(shè)置紫外線燈(多為30W)。內(nèi)室的紫外線燈應(yīng)安裝在經(jīng)常工作的座位正上方，離地面2m，外室的紫外線燈可安裝在外室的中央。

(3)外室需要專用的工作服、鞋子、帽子、口罩、盛蘇兒水的瓷盆和毛巾、噴霧器和5%的煤酸溶液等。

(4)室內(nèi)需要酒精燈、常用接種工具、不銹鋼刀、剪刀、鑷子、70%酒精棉球、工業(yè)酒精、玻璃片、特殊蠟筆、記錄本、鉛筆、標(biāo)簽紙、膠水、廢棄物籃等。

3.無菌室滅菌消毒

(1)薰衣草:這是無菌室徹底滅菌的措施。無菌室長期使用，污染嚴(yán)重時，應(yīng)進(jìn)行熏蒸滅菌。可用甲醛、乳酸或硫磺熏蒸。

(2)噴霧:每次使用無菌室前進(jìn)行。噴霧可以促進(jìn)空氣中的微粒子和微生物沉降，防止桌面和地面的微塵飛場，具有殺菌作用。可以用5%的煤酸噴霧。

(3)紫外線照射:每次使用無菌室前進(jìn)行。紫外線具有良好的殺菌效果。通常打開紫外線燈照射30~60min。

4.無菌室工作規(guī)程

(1)無菌室滅菌。每次使用前打開紫外線燈照射30min以上，或者使用前30min，向內(nèi)外室噴射5%的煤酸。

(2)用肥皂洗手后，將必要的設(shè)備移動到外室，在外室更換滅菌的工作服、帽子和鞋子，戴上口罩，用2%的煤酚肥皂液洗手2分鐘。

(3)將各種需要的物品轉(zhuǎn)移到室內(nèi)清點、位置，用5%的煤酸在桌子上和操作員的站點空間噴霧，返回室外，5~10分鐘后進(jìn)入室內(nèi)工作。

(4)接種操作前，用70%的酒精棉球擦手無菌操作時，動作緩慢，盡量減少空氣變動和地面灰塵。

(5)工作中應(yīng)注意安全。如果棉塞著火，用手握住或用濕布包起來熄滅，不要用嘴吹，以免燃燒擴(kuò)大；如果有菌培養(yǎng)物灑落或打碎有菌容器，用浸潤5%的碳酸抹布包起來，用浸潤5%的碳酸抹布擦拭桌面或地面，用酒精棉球擦拭手后繼續(xù)操作。

(6)工作結(jié)束后，立即收拾桌面，將無菌室保管的物品和廢棄物全部取出無菌室后，在無菌室噴霧5%的煤酸，或者打開紫外線燈照射30min。

1.培養(yǎng)室的設(shè)置

(1)培養(yǎng)室應(yīng)有內(nèi)外兩個，內(nèi)外兩個，內(nèi)外兩個是緩沖室。房間容積不應(yīng)大，有利于空氣滅菌，室內(nèi)面積應(yīng)在3.2×4.4=14m2左右，室外面積應(yīng)在3.2×1.8=6m2左右，高度應(yīng)在2.5m左右。

(2)分隔室內(nèi)和室外墻壁的上部應(yīng)設(shè)置空氣過濾裝置的通風(fēng)口。

(3)為了滿足微生物對溫度的需要，必須設(shè)置恒溫恒濕機(jī)。

(4)內(nèi)外室在室中央設(shè)置紫外線燈，用于滅菌。

2.培養(yǎng)室內(nèi)設(shè)備和工具

(1)室內(nèi)通常配備培養(yǎng)架和搖動機(jī)(搖動床)。常用的搖瓶機(jī)有旋轉(zhuǎn)式、往復(fù)式兩種。(2)外室應(yīng)有專用工作服、鞋子、帽子、口罩、手持噴霧器和5%煤酸溶液、70%酒精棉球等。

3.培養(yǎng)室滅菌、消毒

同無菌室滅菌、消毒措施。

小規(guī)模培養(yǎng)不啟用恒溫培養(yǎng)室，在恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行。

微生物實驗室設(shè)計方案！

微生物觀察、計數(shù)和生理生化測量的場所。室內(nèi)陳設(shè)因工作側(cè)重點不同而有很大差異。一般配備實驗臺、顯微鏡、櫥柜和工具。實驗臺要求平整光滑，實驗箱要充分容納日常使用的工具和藥品等。

是進(jìn)入無菌室前工作人員更衣、洗手的地方。在室內(nèi)設(shè)置無菌室和緩沖室的電源控制開關(guān)，放置無菌操作時穿的工作服、鞋子、帽子、口罩等。

注冊待檢樣本；出具檢驗報告；辦理相關(guān)文件；放松休息等

1.必須安裝獨立的通風(fēng)空調(diào)系統(tǒng)來控制實驗室的氣流方向和壓力。該系統(tǒng)必須確保實驗室的使用，室內(nèi)空氣除了通過排氣管道高效過濾排出外，不得從實驗室的其他部位和間隙排出到室外，同時確保實驗室內(nèi)的氣流從清潔區(qū)域流向污染區(qū)域。進(jìn)風(fēng)口和排風(fēng)口的布局應(yīng)使實驗區(qū)內(nèi)的死亡空間最小化。

2.通風(fēng)空調(diào)系統(tǒng)為直排系統(tǒng)，不得采用部分回風(fēng)系統(tǒng)。

3.環(huán)境參數(shù):與實驗室外部相比，實驗室內(nèi)部保持負(fù)壓。實驗室的相對壓力最好是-30Pa~-40Pa，緩沖室的相對壓力最好是-15Pa~-20Pa。實驗室內(nèi)的溫濕度最好控制在人體的舒適范圍內(nèi)，或者根據(jù)工藝要求來決定。實驗室內(nèi)空氣清潔度最好是GB50073-2001《清潔現(xiàn)場設(shè)計規(guī)范》中定義的7級到8級。實驗室人工照明均勻，不耀眼，照度在500lx以上。

4.為確保實驗室內(nèi)的氣流從清潔區(qū)域流向污染區(qū)域，實驗室內(nèi)不得使用雙側(cè)均勻分布的排氣口布局。不宜采用上送上排的通風(fēng)設(shè)計。生物安全柜排出的經(jīng)內(nèi)部高效過濾的空氣以通過系統(tǒng)的排氣管直接排出到大氣中，也可以送入建筑物的排氣系統(tǒng)。應(yīng)確保生物安全柜與排風(fēng)系統(tǒng)的壓力平衡。

5.實驗室進(jìn)風(fēng)應(yīng)經(jīng)初、中、高效三級過濾。

6.實驗室排風(fēng)必須經(jīng)過高效過濾或其他方法處理后，以不低于12m/s的速度直接排到空中。該排氣口應(yīng)遠(yuǎn)離系統(tǒng)進(jìn)氣口的位置。處理后的排風(fēng)也可排入建筑物的排風(fēng)管道，但不得返回該建筑物的任何部位。

7.進(jìn)風(fēng)和排風(fēng)高效過濾器必須安裝在實驗室設(shè)置在圍護(hù)結(jié)構(gòu)的風(fēng)口上，以免污染管道。

8.在實驗室的通風(fēng)系統(tǒng)中，應(yīng)在進(jìn)氣和排氣總管處安裝氣密型調(diào)節(jié)閥，必要時可完全關(guān)閉室內(nèi)化學(xué)熏蒸消毒。

9.實驗室通風(fēng)系統(tǒng)所使用的所有部件都必須是氣密型。使用的高效過濾器不得為木框架。

10.必須設(shè)置鼓風(fēng)機(jī)啟動自動連鎖裝置，確保實驗室啟動時打開排氣扇后打開鼓風(fēng)機(jī)。關(guān)閉時關(guān)閉鼓風(fēng)機(jī)后關(guān)閉排氣扇