微生物實驗室設計方案!
無菌技術可以有效地避免操作者自身感染微生物。
1.請判斷以下材料或工具是否需要消毒或滅菌。如有必要,請選擇合適的方法。
(1)用于培養(yǎng)細菌的培養(yǎng)基礎和培養(yǎng)盤
(2)倒平板操作討論.培養(yǎng)基礎滅菌后,需要冷卻到50℃左右時,可以用于倒平板。用什么方法來估算培育基的溫度?
提示:用手觸摸有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫度剛下降到不燙手的時候,可以打倒平板。
2.為什么要讓錐瓶瓶口通過火焰?
a:燃燒滅菌,防止瓶口微生物污染培養(yǎng)基。
3.平板冷凝后為什么要倒置平板?
a:平板凝結后,盤蓋凝結水珠,凝結的培養(yǎng)基表面濕度也高,倒置平板,可以更好地揮發(fā)培養(yǎng)基表面的水分,防止盤蓋的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。
4.在倒平板的過程中,如果不小心培養(yǎng)基濺到盤蓋和盤底之間的部位,這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎?為什么?
a:空氣中的微生物可能在盤蓋和盤底之間的培育基礎上繁殖,所以最好不要用這個平板培育微生物。
(3)平板刻劃操作的討論
1.為什么在操作的第一步和每次刻劃之前都會燃燒接種環(huán)?劃線操作結束時,還需要燒烤接種環(huán)嗎?為什么?
a:操作的第一步燒焦接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物,每次在劃線前燒焦接種環(huán)是為了殺死上次劃線結束后,接種環(huán)上殘留的菌種,下次劃線時,接種環(huán)上的菌種直接來自上次劃線的末端劃線結束后,灼熱接種環(huán),能夠立即殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。
2.灼熱接種環(huán)后,為什么要等冷卻后再進行劃線?
a:接種環(huán)溫度過高,不要殺菌。
3.做第二次和后續(xù)的劃線操作時,為什么總是從上次劃線的末端開始劃線?
a:劃線后,線末端細菌的數量比線的開始少,每次從上次劃線的末端開始,細菌的數量隨著劃線次數的增加而逐漸減少,最終可以得到單個細菌繁殖的菌落。
(4)涂布平板操作的討論
涂布平板的所有操作都應在火焰附近進行。結合平板線和系列稀釋的無菌操作要求,想想第二步該怎么做無菌操作
提示:從操作的細節(jié)保證無菌。例如,酒精燈與培養(yǎng)盤的距離適當,吸管頭不接觸其他物體,吸管在酒精燈火焰周圍等。
(5)練習
1.提示:從微生物成長所需條件的角度來考慮。例如,微生物的生長需要水、空氣、適當的溫度,食品的保存可以通過保持干燥、真空的條件和冷藏等方法阻止微生物的生長。
2.提示:從這三種培養(yǎng)技術的原理、操作步驟等方面可以分別總結。例如,這三種培養(yǎng)技術都需要為培養(yǎng)物提供足夠的營養(yǎng),但是無土培養(yǎng)技術的操作不需要保證無菌的條件,其他兩種技術都需要嚴格的無菌條件。
3.提示:這是一個開放的問題,答案不是唯一的,重點是鼓勵學生積極參與,從不同的角度思考問題。例如,由于證明微生物不是自發(fā)的,微生物學可能發(fā)展成為獨立的學科,巴斯德實驗中使用的加熱滅菌方法出現了有效的滅菌方法,該滅菌原理也適用于食品的保存等。