細胞工程是以離體細胞和組織的無菌操作為基礎的實驗性學科,它需要在模擬動、植物細胞生長發育而設置的實驗條件和環境下進行一系列操作。為此需要各種實驗設施、設備、適宜的培養條件與技術。今天為大家介紹細胞工程實驗室的組成設置,以及所配置的常用儀器設備。
細胞工程實驗室的組成設置
細胞工程實驗室主要由洗滌室、滅菌室、配制室、無菌操作室(接種室)、培養室、鑒定室等組成。
1.洗滌室
用途:洗滌室主要用于玻璃器皿、用具和培養材料清洗。
配置:洗滌水槽、落水架、干燥箱、柜子、超聲波清洗器等。
2.滅菌室
用途:用于培養基及培養器械的滅菌。
配置:配備實驗臺、高壓滅菌鍋、排風滅火設備、細菌過濾設備、干熱消毒柜、電爐等。
要求:設備的安裝和排列要合理,房間要寬敞明亮,通風條件好,地面要便于清潔、防滑。
3.配制室
用途:配制室主要用于配置培養基。
配置:冰箱、天平、微波爐、pH計、培養基分裝器、藥品柜、器械柜、抽氣泵、電爐、各種規格的培養瓶和用具、培養皿、移液管、燒杯、量筒、容量瓶、儲藏瓶等。
4.無菌操作室(接種室)
用途:主要用于實驗材料的接種操作。設置緩沖準備區(更換衣帽、拖鞋、洗手等)和接種區(培養材料的無菌操作)。
配置:超凈工作臺或接種箱、固定式載物臺、移動式載物臺、廣口瓶、酒精燈、紗布、器械支架、手術剪、解剖刀、解剖針、鑷子等。
要求:無菌操作室在工作方便的前提下,宜小不宜大,宜精細密閉,忌粗陋放散,是細胞組織培養研究或生產工作中最關鍵的部分,關系到培養物的污染率,接種工作效率等重要指標。
5.培養室
用途:能控制光照和溫度,保持相對無菌的狀態,防止微生物感染,對離體材料進行控制培養。
要求:應保持干燥和清潔。
配置:培養架、轉床、搖床、光照培養箱、人工氣候箱、生化培養箱、自動控時器、 搖床等。
6.鑒定室
用途:對培養材料進行細胞學鑒定和研究。由制片區和顯微觀察區組成。
要求:清潔、明亮、干燥,使各種光學儀器不受潮濕和灰塵污染
配置:各種光學儀器
7.生化分析室
用途:在以培養細胞產物為主要目的的實驗室中,應建立相應的分析化驗實驗室,以便于對培養物的有效成分隨時進行取樣檢查。大型的次生產物生產實驗室,還應建立有效物質分離實驗室。
BSLK"> 注意事項
細胞工程實驗室布局便于隔離、便于操作、便于滅菌、便于觀察,可根據細胞工程實驗的操作程序安排。接種室、培養室應放在與外界環境的隔離的區域,滅菌室應與接種室相鄰等等。
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洗滌室設備 | 配置室設備 |
細胞工程實驗室常規設備
實驗室主要儀器設備包括常規設備、滅菌設備、培養設備等。熟練掌握它們的結構、用途、使用方法及注意事項是順利完成實驗的重要保證。
主要是用于試劑保存與稱量、培養基配制與分裝和水處理等。如天平、冰箱和冰柜、酸度計、離心機、水純化裝置等。
1、天平
主要用途:試劑、樣品和標準品的稱量;
性能要求:不同精度的天平(0.001或0.0001,0.01或0.1);
配置數量:2~3臺
2、冰箱
主要用途:用于各種維生素和激素類藥品及培養基母液的保存或某些實驗材料的低溫處理;
性能要求:低溫冰箱,有時需用到超低溫冰箱(-80℃)
配置數量:1~2臺
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低溫保存箱 | 超-86/-150℃低溫保存箱 |
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低溫保存箱 | 超-86/-150℃低溫保存箱 |
3、酸度計
主要用途:用于測定培養基及其它溶液的pH;
性能要求:一般要求可測定pH范圍1-14之間,精度0.01即可;
4、離心機
主要用途:用于細胞、原生質體等活細胞分離,亦用于培養細胞的細胞器、核酸以及蛋白質的分離提??;
性能要求:
>細胞、原生質體等活細胞的分離用低速離心機
>核酸、蛋白質分離用高速冷凍離心機
>規?;a次生產物,還需選擇大型離心分離系統
5、加熱器
主要用途:用于培養基的配制
配置:電爐、微波爐
6、純水裝置
主要用途:離體培養應使用符合試驗要求的純水或蒸餾水;
配置:蒸餾水器、純水機
7、分裝設備
主要用途:用于大型生產實驗室培養基的分裝。
細胞工程實驗室滅菌設備
實驗室主要儀器設備包括常規設備、滅菌設備、培養設備等。熟練掌握它們的結構、用途、使用方法及注意事項是順利完成實驗的重要保證。
1、高壓蒸汽消毒裝置
培養基、蒸餾水、不含糖的緩沖液、培養器皿及其他用具等均需經過高壓蒸汽消毒滅菌后方可使用。高壓滅菌器時,一般在120℃ ,控溫15 ~ 40分鐘既可切斷電源,緩慢降壓至讀數為0時,方可取出滅菌物。
高壓滅菌器:手提式、立式、臥式

2、干燥滅菌器
用于各種用具的滅菌。通常采用160 ~ 180°C持續90分鐘來滅菌。
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干熱滅菌器 | 上海一恒鼓風干燥箱(烘箱) |
細胞工程實驗室培養設備
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上海旻泉光照培養箱 | 人工氣候箱 |
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搖床(振蕩器) | 生物反應器 |
2、倒置顯微鏡
多用于隔瓶觀察、記錄外植體及懸浮培養物(細胞團、原生質體等)的生長情況。
3、雙筒實體顯微鏡
多用于剝離植物莖尖。
4、細胞計數工具
用作培養細胞的計數和活性的觀察。
5、細胞冷凍保存裝置
普通的液氮容器常稱為液氮罐。液氮溫度約為-196°C ,使用時要注意勿使液氮濺到皮膚上,以防凍傷。由于液氮不斷揮發,應注意觀察存留液氮情況,及時補充液氮,避免揮發過多而導致細胞受損。
6、其他儀器如磁力攪拌器、恒溫水浴箱、振蕩器、超聲波清洗儀等。
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加熱型磁力攪拌器 | 恒溫水浴鍋 |
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加熱型磁力攪拌器 | 超聲波清洗儀 |
細胞工程實驗室培養容器與用具
1、接種用具

用途:主要用于接種外植體、解剖動物、取材和原代培養中切割組織。
消毒方法采用高壓蒸汽消毒或采用70%酒精浸泡消毒。
2、培養器皿
指盛有培養基并提供培養物生長的無菌器皿。
玻璃容器:一般用無色并不產生顏色折射的硼硅酸鹽玻璃材質( 包括各種規格的培養皿、三角瓶、試管、培養瓶)
塑料容器:材質輕、不易破碎、制作方便,使用廣泛(一次性的和可重復使用的)
3、移液器
手動、電動移液器(根據需求選用微量或多排型號)
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艾本德Eppendorf Research® plus 手動移液器 | 艾本德Eppendorf Xplorer® plus電動移液器 |
(五)無菌操作設備
超凈(凈化)工作臺是目前已普遍應用的無菌操作裝置。
超凈工作臺的工作原理是利用鼓風機驅動空氣遁過高效濾器除去空氣中的塵埃顆粒,使空氣得到凈化。凈化空氣徐徐通過工作臺面,使工作臺內構成無菌環境。

如果細胞工程實驗室設有生化分析室,則還需要配備相應的生化分析儀器設備,如酶標儀、高效液相色譜儀等。
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